REPRESENTACIÓN EXCLUSIVA - Productos aprobados por ANMAT
Ovoselect® – Evaluación fisiológica de precisión en tiempo real de la calidad ovocitaria
Ovoselect® es un innovador kit de diagnóstico in vitro diseñado para determinar el índice de fragmentación del ADN de las células del cúmulus como biomarcador de la calidad de los ovocitos.
Una alta fragmentación de ADN en las células del cúmulus que rodean al ovocito esta estrechamente relacionado con una menor calidad ovocitaria, bajas tazas de fertilización y un desarrollo embrionario normal.
Ovoselect permite evaluar el nivel de fragmentación de ADN en las células del cúmulus, brindando información fisiológica clave y en tiempo real de la calidad del ovocito sin intervenir en el ovocito en sí.
Ovoselect puede indicarse en procedimientos de FIV, ICSI y de Vitrificación.
¿Por qué usar Ovoselect?
Ovoselect proporciona mayor seguridad en el análisis de la calidad ovocitaria, de forma que incrementa el éxito del resultado reproductivo.
¿Cuál es la base científica de Ovoselect?
Ovoselect se basa en las diferencias significativas que se observan en las características de la cromatina de las células del cúmulo procedentes de ovocitos maduros e inmaduros.
Además, también pueden identificarse las ces que presentan un núcleo con el ADN fragmentado. Ovoselect pone en evidencia las diferencias en las características de las células del cúmulo dependiendo de su madurez y de la calidad del ADN nuclear.
Producto aprobado por ANMAT registro PM 2148-25
Tiene una validez de 12 meses desde su fabricación.
Se almacena en heladera de 2° a 8°C.
El Kit contiene 80 determinaciones con:
-(ACS) Soporte celular de agarosa; 2 tubos de
tapón de rosca
-(SCS) Portaobjetos pretratados; 10 unidades
-(ET0.2) Tubos Eppendorf; 80 unidades
-(ET0.5) Tubos Eppendorf; 10 unidades
-Solución 1 (LS) Solución de lisis, 10 ml
-Solución 2 (SB) Tampón de estabilización, 10 ml
-Solución 3 (SSA) Solución de tinción de eosina A, 10 ml
-Solución 4 (SSB) Solución de tinción de tiazina B, 10 ml
-(HSF) Flotador, 1 unidad
-Instrucciones de uso
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Explicación de la técnica en el laboratorio
1 - AGAROSA
Colocar los viales de agarosa (ACS) en baño a 95-100°C por 5´ y fraccionar 10 Eppendorf de 0,5 ml con 180μl de agarosa cada uno. Reservar en la heladera hasta su uso.
2 - CELULAS DEL CUMULUS
Por cada ovocito recuperado, cortar un fragmento de las células del cúmulus con agujas y colocarlo en un Eppendorf (individual) con la menor cantidad de medio posible. También pueden provenir de células decumuladas para vitrificación/ICSI.
3 - HIALURONIDASA
Si se corto un fragmento de las células, agregar 50μl de hyalu al tubo y dejar reposar por 4´y luego disgregar con un tip por 1´.
Centrifugar por 2, levantar el sobrenadante y resuspender en 8μl de medio. Visualizar en cámara makler para confirmar la presencia de células (10-15 por campo idealmente).
4 - CELULAS + AGAROSA
Colocar la agarosa en un baño a 70°C aprox. por 5´, comprobar que se desolidificó y mantener 2´a 37°C antes de colocar las células. En un tubo Eppendorf de 0,2ml colocar 5μl de las células y 10μl de agarosa. Mantenerlo en baño a 37°C para que no se solidifique.
5 - SIEMBRA PORTAOBJETOS
La siembra se realiza en 2 instancias y de a 4 muestras. Sacar del baño los tubos de células + agarosa y sembrar en cada well 2μl. Primero sembrar 1A, 1B, 2A y 2B y cubrir con un cubreobjetos de 24x24 y luego sembrar 1C, 1D, 2C y 2D y cubrir de la misma manera.
6 - HELADERA
Colocar el portaobjetos en una superficie metálica y llevar a la heladera por 5´para que solidifique la agarosa.
7 - PROCESAMIENTO
Sacar del slide de la heladera y cuando esta a temperatura ambiente, deslizar suavemente el vidrio de manera horizontal. Colocar el slide en una posición elevada sobre una placa de 35 ó 60 o 100mm para comenzar a aplicar las soluciones. Todos los pasos se realizan a temperatura ambiente. Luego de colocar las soluciones e incubar, se inclina suavemente y de manera horizontal el slide para sacar cada solución y colocar de acuerdo a la descripción debajo. Es importante retirar los reactivos sin agitar el portabobjetos.
• Solución 1 (LS): 1 gota por well, se deja incubar por 3´.
• Solución 2 (SB): 1 gota por well, se deja incubar por 3´.
• Alcohol al 96% frio: 1 gota por well, se deja incubar por 2´.
Luego de estos pasos dejar secar de manera horizontal sobre un papel aprox. 3´
• Solución 3 (SSA): 1 gota por well, se deja incubar por 15´.
• Solución 4 (SSB): 1 gota por well, se deja incubar por 15´.
Finalmente, lavar todo el slide con agua de la canilla y dejar secar
